Sve preporučene normale sjemena temelje se na analizama dokazano plodnih mlađih muškaraca (postignuta trudnoća u zadnjih 12 mjeseci). Sjeme je ujedno odraz općeg zdravlja muškarca.
Preporuke i kriteriji WHO 2021. za normalan spermiogram temelje se na analizi sjemena plodnih muškaraca, a ne opće populacije. Ocjena neplodnog sjemena puno je složenija i problematična, jer ovisi o brojnim čimbenicima (pa i ukupnoj plodnosti para).
Temeljne preporuke:
poštivati točno vrijeme pojedinih procedura (od ejakulacije)
- apstinencija 2 do 7 dana
- u prvih 5 minuta odrediti volumen (vaganjem)
- likvefakcija – ne dulje od 30 minuta
- unutar 30 do 60 minuta: odrediti pH, makroskopski izgled, analiza vitalnosti, koncentracija spermija
- ostale analize unutar 3 sata
potrebna je analiza cijelog ejakulata dobivenog masturbacijom
- postojana temperatura ejakulata 20°C-37°C
- transport do laboratorija < 30 minuta od davanja uzorka
- uzorak do analize najbolje držati u inkubatoru (37°C).
daljnja analiza i brojenje spermija (min. 200-400 spermija)
- pomoću komorica – haemocytometar, Makler, Photometar
- pomoću CASA (computer assisted sperm analysis)
- centrifugiranje i reanaliza
Koje su temeljne mjere za plodnost sjemena:
- volumen ejakulata
- imunološke pretrage
- koncentracija (broj) spermija i viabilnost
- upalni parametri
- pokretljivost spermija i vitalnost
- udio morfološki normalnih spermija
Koje su napredne analize sjemena:
- DNA fragmentacija sjemena (DFI)
- Genetsko i genomsko testiranje (sperm aneuploidy test)
- Leukociti
- Interleukini
- Protutijela (MAR test)
- Biokemijske pretrage (cink, fruktoza)
- Sekvencioniranje ejakulata
- Seminalni oksidativni stres i ROS testiranje
- Akromosomska reakcija.
CASA sistemi su poboljšanje samo za kinematične analize spermatozoida, uz nužnost promatranja 200-400 spermija. Postotak pokretljivosti nije najvjerodostojniji, a priprema i postupnik za CASA analize je složen i ovisan o brojenim čimbenicima. Optimalno tumačenje rezultata CASA zahtijeva analizu većeg broja spermija i sofisticiranu statistiku. Automatizirani stroj zahtijeva pomnu kontrolu kvalitete (QC) i standardizaciju.
WHO 2021. smatra da još uvijek nema dovoljno dokaza za vjerodostojnu upotrebu CASA u široj kliničkoj praksi.
Neki centri autoritativno naglašavaju vrijednost IMSI (MSOME) metode ocjene organela spermija (vakuole i dr.) uz veliko mikroskopsko povećanje. Na žalost ta je metoda napuštena jer nisu utvrđene nikakve dodatne prednosti te analize.
